تولید سازه نوترکیب با همسانه سازی ژن دومین ۴ آنتی ژن حفاظتی و هم جوشی آن با ژن دومین ۱ فاکتور کشنده باسیلوس آنتراسیس در اشرشیاکلی

Authors

محمد نجاراصل

mohammad najarasl department of biology, comprehensive university of imam hossein, tehran, iran.گروه زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران. محمد صادق هاشم زاده

mohammad sadegh hashemzadeh applied virology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran.مرکز تحقیقات ویروس شناسی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله الاعظم (عج)، تهران، ایران. حسین هنری

hosein honari department of biology, comprehensive university of imam hossein, tehran, iran.گروه زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران. جعفر موسوی

jafar mousavy department of biology, comprehensive university of imam hossein, tehran, iran.گروه زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)، تهران، ایران. فیروز ابراهیمی

abstract

مقدمه: سیاه زخم یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل ایجاد کننده این بیماری مهلک باکتری باسیلوس آنتراسیس می ­باشد. در حال حاضر آنتی ژن حفاظتی(pa) به عنوان واکسن موثر سیاه زخم مورد استفاده قرار می­گیرد. دومین 4 این آنتی ژن به همراه دومین 1 فاکتور کشنده(lf)، ایمونوژن ­های قوی این باکتری بوده و به عنوان کاندید مناسب واکسن علیه آن مطرح می باشند. هدف ما در این تحقیق، همسانه سازی ژن دومین 4 آنتی ژن حفاظتی(pad4) و هم جوشی آن با ژن دومین 1 فاکتور کشنده(lfd1) باکتری، به منظور بررسی توانایی آن ها در القاء ایمنی حفاظتی می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، از یک وکتور pgem-t easy نوترکیب حاوی ژن­ lfd1 استفاده شد. سپس ژن pad4 با واکنش آنزیمی pcr تکثیر و جداسازی شده و به طور جداگانه در وکتور pgem-t easy دیگری همسانه سازی گردید. بعد از آن واکنش الحاق ژن pad4 به ژن lfd1 در وکتور فوق با تعیین جهت گیری lfd1 و توسط جایگاه های آنزیمی psti و xbai انجام پذیرفت. سازه نوترکیب حاصل از دو ژن فوق در ناقل بیانی pet28a به کمک آنزیم های محدود الاثر bamhi و xhoi زیر همسانه سازی گردید و پس از تعیین جهت گیری ژن ها، میزبان بیانی bl21 توسط این ناقل نوترکیب تراریخت گردید. یافته های پژوهش: همسانه سازی اولیه و هم جوشی قطعات ژنی pad4 و lfd1 در ناقل pgem-t easy با موفقیت انجام شد و پس از تایید فرآیند فوق با دو روش برش آنزیمی و pcr، سازه نوترکیب حاصل با موفقیت در pet28a زیر همسانه سازی شد. بحث و نتیجه گیری: با توجه به ایمونوژن بودن نواحی pad4 و lfd1، بیان پروتیئن این سازه نوترکیب حاصل از نواحی ژنی الحاق شده فوق، می تواند برای القاء ایمنی محافظتی، به عنوان کاندید مناسب واکسن سیاه زخم مطرح باشد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

تولید سازه نوترکیب با همسانه سازی ژن دومین 4 آنتی ژن حفاظتی و هم جوشی آن با ژن دومین 1 فاکتور کشنده باسیلوس آنتراسیس در اشرشیاکلی

مقدمه: سیاه زخم یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل ایجاد کننده این بیماری مهلک باکتری باسیلوس آنتراسیس می ­باشد. در حال حاضر آنتی ژن حفاظتی(PA) به عنوان واکسن موثر سیاه زخم مورد استفاده قرار می­گیرد. دومین 4 این آنتی ژن به همراه دومین 1 فاکتور کشنده(LF)، ایمونوژن ­های قوی این باکتری بوده و به عنوان کاندید مناسب واکسن علیه آن مطرح می باشند. هدف ما در این تحقیق، همسانه سازی ژن دومین 4 ...

full text

همسانه سازی و بیان ژن دومن a-۱ آنتی ژن حفاظتی باسیلوس آنتراسیس در باکتری اشرشیا کلی

سیاه زخم (آنتراکس) یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل ایجاد کننده بیماری، باکتری باسیلوس آنتراسیس می باشد و آنتی بادی دومن a-1 آنتی ژن حفاظت کننده 62 (pa) درصد از آنتی ژن های مربوط به آنتی ژن حفاظت کننده (pa) را شناسایی می کند و بالاترین حضور اولیگو پپتیدهای آن در واکسن های avp مشاهده شده است. در این مطالعه تجربی، توالی مورد نظر از پلاسمید pxoi با جایگاه های آنزیمی bamhi و xhoi تکثیر و د...

full text

همسانه سازی و بیان آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس در باکتری e. coli

زمینه و هدف: سیاه­زخم یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل این بیماری باکتری باسیلوس آنتراسیس می­باشد. آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس برای درمان و واکسن قابل استفاده می باشد. هدف این مطالعه بیان آنتی ژن حفاظتی تغییر یافته باسیلوس آنتراسیس در باکتریe. coli می­باشد.  مواد و روش ها:  قطعات ژنی مورد نظر از پلاسمید pxoi  تکثیر و  با عمل soeiong pcr  قطعه بدست آمده در کلونینگ وکتور ...

full text

جهش زایی ، کلون کردن و تعیین ترادف بازی ژن آنتی ژن ایمنی بخش باسیلوس آنتراسیس در اشرشیاکلی

زمینه: آنتی‌ژن ایمنی‌بخش باسیلوس‌آنتراسیس (PA) پروتئینی با خاصیت اتصال به گیرنده‌های سطحی سلول‌های بدن انسان می‌باشد ولی در سطح سلو‌ل‌های سرطانی گیرنده اختصاصی uPA (Urokinase plasminogen activator) ایجاد می-شود که این پروتئین قدرت اتصال به آن‌‌‌‌را ندارد. هدف از انجام این تحقیق تغییر جایگاه اتصال موجود بر روی PA با جهش‌زایی مستقیم می‌باشد که این پروتئین فقط بتواند به سلول‌های سرطانی متصل گردد. ...

full text

کلون کردن ژن جهش یافته آنتی ژن ایمنی بخش باسیلوس آنتراسیس(PA) در باسیلوس سوبتیلیس

سابقه و هدف: آنتی  ­ژن ایمنی بخش باسیلوس آنتراسیس پروتئینی با خاصیت اتصال به گیرنده­ های سطح تمام سلول­ های بدن انسان می­ باشد. در سطح سلول ­های سرطانی گیرنده اختصاصی فعال کننده یوروکینازی پلاسمینوژن (uPA) ایجاد می ­شود که در سطح سایر سلول­ های نرمال بدن مشاهده نمی ­شوند. هدف از انجام این تحقیق تغییر جایگاه اتصال موجود بر روی PA با جهش ­زایی مستقیم می ­باشد به نحوی که این پروتئین فقط بتواند به ...

full text

همسانه سازی و بیان ژن ناحیه یک فاکتور کشنده ی (lethal factor) باسیلوس آنتراسیس در باکتری escherichia coli

زمینه و هدف: سیاه زخم (آنتراکس) یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل ایجاد کننده بیماری باکتری باسیلوس آنتراسیس می باشد که آنتی ژن حفاظت کننده (pa) و ناحیه یک فاکتور کشنده (lfd1) ایمونوژن های قوی این باکتری بوده و همواره به عنوان کاندیدای واکسن علیه باسیلوس آنتراسیس در نظر گرفته شده اند. هدف این مطالعه تولید آنتی ژن ناحیه یک فاکتور کشنده(lfd1) در باکتری escherichia coli می باشد. روش بررسی:...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام

جلد ۲۳، شماره ۷، صفحات ۱۸-۲۷

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023